Kako izmjeriti rast bakterija

Sadržaj

• faze
• 1. metoda izravno promatrati bakterije
• Metoda 2 Mjerenje biomase
• Metoda 3 Nastaviti turbidimetrijom

U ovom članku: Izravno promatranje bakterijaMjerite biomasuPostupak turbidimetrijom8 Reference

Postoji nekoliko načina za mjerenje rasta bakterija, a neki su teže provesti od drugih. Najjednostavniji se uobičajeno koriste i daju relativno točne rezultate, pod uvjetom da su rigorozni tijekom mjerenja. Najčešće tehnike su promatranje i brojanje bakterija, mjerenje biomase i suhe biomase i turbidimetrija. Vaš školski laboratorij trebao bi imati opremu potrebnu za barem jednu od ovih metoda.

faze

1. metoda izravno promatrati bakterije

1. 
   

   
   Pripremite opremu. Uz ono što se obično nalazi u svim biološkim laboratorijima, trebat će vam i neki određeni predmeti. Provjerite imate li pri ruci sve instrumente i spremnike, tako da ne morate ići naprijed i natrag u ormaru gdje se oprema sprema. Unaprijed razmislite što ćete učiniti kako biste znali što ćete koristiti u svakoj fazi. Morat ćete znati i neke ključne pojmove.
   • Dobivanje hemacitometra. To je lopatica s komorama numeriranja koja je povezana s mikroskopom. To je vrlo jednostavan instrument za prilagodbu i uporabu. Možete pronaći neke od dobavljača specijaliziranih za opremu za škole i istraživačke laboratorije. Obično se daje korisnički priručnik.
   • Uzmi petrijevu posudu. Ovo je mali okrugli plitki spremnik u kojem možete promatrati bakterije.
   • Izraz "kultura" odnosi se na mikroorganizam koji se umjetno razmnožava u sklopu znanstvenog eksperimenta.
   • "Buha kulture" medij je u kojem će se kultura razvijati.

2. 
   

   
   
   
   Koristite petrijevu posudu. Stavite bakterije u kutiju i promatrajte je pod mikroskopom. Možete je staviti i izravno na tobogan. Zatim prebrojite broj prisutnih bakterijskih stanica.

3. 
   

   
   Provjerite imate li ispravnu koncentraciju. Ako ima previše bakterija, one će se preklapati i nećete ih moći pravilno prebrojati. Ako je to slučaj, razrijedite kulturu miješajući je s malo juhe. Ako ih je premalo, rezultat neće biti značajan. Zatim morate filtrirati juhu da povećate koncentraciju.

4. 
   

   
   Brojite bakterije. Posljednji korak je jednostavno brojanje. Pogledajte mikroskopske komore pod mikroskopom i zabilježite broj stanica koje vidite. Usporedite rezultat s drugim sličnim iskustvima.

Metoda 2 Mjerenje biomase

1. 
   

   
   
   
   Provjerite da imate potrebne instrumente. Ova metoda je spora za implementaciju i uključuje upotrebu skupe opreme. Ako je ne operete, upotrijebite drugu tehniku. S druge strane, ako laboratorij u kojem se nalazite ima prave alate, mjerenje biomase i suhe mase idealno je jer daje točne rezultate. Trebate:
   • hidraulička peć s prisilnom konvekcijom,
   • aluminijska vaga,
   • nekoliko tikvica Erlenmeyer,
   • centrifugom ili laboratorijskim sustavom za filtriranje.

2. 
   

   
   Provjerite je li usjev u tikvici Erlenmeyer. Ako to nije slučaj, ulijte ga. U ovoj fazi eksperimenta, bakterije su još uvijek u bujonu kulture. Oni će se kasnije razdvojiti.

3. 
   

   
   Osušite posudu za vaganje. Za to ga stavite u pećnicu. Možete koristiti i membranski filter celulozni acetat promjera 47 mm sa porama 0,45 µm. Bez obzira na alat koji se koristi, precizno izmjerite njegovu masu tako da se ona može oduzeti od rezultata koje ste dobili kada je usjev postavljen na nju.

4. 
   

   
   Mix. Promiješati lerlenmeyer tako da kultura bude homogena. Doista, zbog gravitacije, stanice prirodno teže padaju na dno spremnika. Dakle, morate se malo protresti za koja su raspoređena jednoliko i da je vaš uzorak reprezentativniji.

5. 
   

   
   Centrifuga. Pomoću centrifuge odvojite bakterije od bujona. Ovaj se uređaj koristi za okretanje spremnika i protuteže pri vrlo velikim brzinama. Juha teče, koja zadržava samo živu materiju. Da biste saznali više, na internetu ćete pronaći informacije o tome kako koristiti centrifugu.

6. 
   

   
   Izvadite tijesto. Baci ga na tavu za vaganje. Možete baciti bujon s kulturom, više vam ga neće trebati, ali držite lerlenmeyer pri ruci.

7. 
   

   
   Isperite centrifugu. Ulijte vodu za ispiranje u posudu za vaganje pored bakterijskih stanica. Rezultat dobiven za sve daje vam biomasu.

8. 
   

   
   Pronađite suhu masu. Da biste znali suhu biomasu svog uzorka, stavite vagu u pećnicu na 100 ° C na razdoblje od 6 do 24 sata, u skladu s uputama priloženim uz vaš uređaj. Pazite da ne prekoračite tu temperaturu kako ne biste izgorjeli bakterije. Zatim sve izvažite, a zatim oduzmite masu pladnja.

Metoda 3 Nastaviti turbidimetrijom

1. 
   

   
   Pripremite svoju opremu. Trebat će vam izvor svjetlosti i spektrofotometar, uređaj koji se nalazi u većini znanstvenih laboratorija. Pogledajte priloženi korisnički priručnik jer svaki model ima svoj rad. Ova je metoda jedna od najčešće korištenih za mjerenje rasta bakterija, jer zahtijeva samo jeftine i jednostavne alate.

2. 
   

   
   Unesite svjetlo u kulturu. Zamućenost se koristi za procjenu sadržaja tekućine u česticama, a ona određuje je li više ili manje oblačno. Rezultat koji ćete dobiti ovim mjerenjem bit će dan u NTU (ili nefelometrijskim jedinicama mutnoće). Možda će biti potrebno izvršiti umjeravanje uređaja kako bi se precizno izmjerio zamućenost uzorka.

3. 
   

   
   Vodite bilješke. Mučnina je količina bakterija u uzorku. Spektrofotometar će vam također omogućiti da znate propusnost otopine (% T), čija je vrijednost obrnuto proporcionalna vrijednosti mutnoće. Zatim usporedite rezultate dobivene na različitim uzorcima za mjerenje rasta bakterija.